時(shí)間

里程碑事件

2005年3月24日

國務(wù)院針對**流通和接種監管環(huán)節制定了《**流通和預防接種管理條例》。

2006年4月4日

家疾病預防控制局針對**在儲存、運輸監管環(huán)節制定《**儲存和運輸管理規范》。

2019年6月29日

廣受社會(huì )各界關(guān)注的《**管理法》表決通過(guò)，將從2019年12月1日起實(shí)施，引起社會(huì )的廣泛關(guān)注，《**管理法》是將分散在多部法律法規中的監管規定進(jìn)行了全鏈條統籌整合，涵蓋**研制、生產(chǎn)、流通、預防接種各個(gè)環(huán)節，將**監管提升到法律層級，行業(yè)人士稱(chēng)這是史上最嚴的**管理法。

2019年9月2日

國家藥品監督管理局藥品審評中心官網(wǎng)發(fā)布《**上市后生產(chǎn)工藝變更技術(shù)指導原則》公示稿，彌補了我國對**上市后生產(chǎn)工藝變更技術(shù)在法規層面和技術(shù)層面的空白。

2019年11月12日

國家**檢查中心官網(wǎng)發(fā)布《**生產(chǎn)現場(chǎng)檢查指南》（征求意見(jiàn)稿），這是國內首部針對**生產(chǎn)現場(chǎng)檢查指南。

序號

法規依據

1

《中華人民共和國藥品管理法》

2

《中華人民共和國**管理法》

3

《中華人民共和國藥品管理法實(shí)施條例》

4

《中華人民共和國藥典》

5

《藥品注冊管理辦法》

6

《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規范》及其附錄

7

《藥品注冊核查管理規定》

8

《**儲存和運輸管理規范》

9

《生物制品批簽發(fā)管理辦法》

10

《藥品不良反應報告和監測管理辦法》

11

《**流通和預防接種管理條例》

12

《藥品召回管理辦法》

13

《藥品說(shuō)明書(shū)和標簽管理規定》

14

《藥品生產(chǎn)企業(yè)現場(chǎng)檢查風(fēng)險評定原則》

15

《醫療廢物管理條例》

16

《病原微生物實(shí)驗室生物安全管理條例》

17

《食品藥品監管總局國家衛生計生委關(guān)于進(jìn)一步加強**流通監管促進(jìn)**供應工作的通知》（食藥監藥化監〔2017〕76號）

18

藥監管理部門(mén)批準的各**企業(yè)制造及檢定規程

關(guān)鍵點(diǎn)

檢查要點(diǎn)

 細胞基質(zhì)

細胞基質(zhì)系指可用于**生產(chǎn)的所有動(dòng)物或人源的連續傳代細胞系、二倍體細胞株、原代細胞及重組工程細胞等。企業(yè)應當按照《中國藥典》和藥品GMP要求建立符合生產(chǎn)要求的細胞庫。生產(chǎn)和檢定用細胞應符合現行《中國藥典》三部生物制品通則中“生物制品生產(chǎn)檢定用動(dòng)物細胞基質(zhì)制備及檢定規程”的相關(guān)要求。

1) 生產(chǎn)和檢定用細胞歷史來(lái)源清晰、有證明資料。

2) 生產(chǎn)用原代細胞制備和檢定應符合《中國藥典》的要求；制備注射用減毒活**的原代細胞和動(dòng)物組織應來(lái)源于無(wú)特定病原體（SPF）級動(dòng)物（包括雞胚）；制備口服**和滅活**的原代細胞應來(lái)自清潔級或清潔級以上動(dòng)物。

3) 傳代細胞應按照《中國藥典》要求建立細胞庫并符合規定。工作細胞庫的生物學(xué)特性、遺傳學(xué)特性應與主細胞庫一致，傳代次數與已批準的要求一致，不應超過(guò)規定的代次。

4) 主細胞庫、工作細胞庫及生產(chǎn)終末代細胞應按照《中國藥典》的要求進(jìn)行檢定。

5) 儲藏容器應當在適當的溫度下保存，并有明確的標簽，標簽應至少標記細胞的編號、名稱(chēng)、代次、批號、制備日期等內容。

6) 細胞庫應在規定的條件下專(zhuān)用設備保存，專(zhuān)人負責；出入庫應有規定和記錄。

7) 細胞庫存儲區域應當建立人員授權、進(jìn)出登記制度，避免非授權人員接觸細胞。

8) 儲存期間，應當能夠對儲存條件（例如，液氮液位等）進(jìn)行適當的監控，及時(shí)發(fā)現儲存條件變化，確保細胞的保存條件。

9) 細胞庫，尤其是主細胞庫應備份，并在不同地點(diǎn)保存，應考慮停電、火災等應急情況的影響。

10) 應對工作細胞庫復蘇能力等進(jìn)行考察，了解細胞儲存期間的質(zhì)量變化，考察可在**生產(chǎn)過(guò)程中同步進(jìn)行。

菌毒種

菌毒種是指直接用于**制造和檢定的細菌、病毒、DNA重組工程菌等。**生產(chǎn)用菌毒種應按照《中國藥典》和藥品注冊要求建立種子批系統。生產(chǎn)用菌毒種需用動(dòng)物傳代時(shí)，應使用SPF級動(dòng)物。

1) 生產(chǎn)和檢定用菌毒種歷史來(lái)源清晰、有證明資料。

2) 應在符合GMP條件下建立主種子批和工作種子批；工作種子批的生物學(xué)特性和遺傳學(xué)特性應與主種子一致。

3) 應建立生產(chǎn)用菌毒種主種子批全基因序列的背景資料，減毒活**主種子批應進(jìn)行全基因序列測定，應對生產(chǎn)用菌毒種已知的主要抗原表位的遺傳穩定性進(jìn)行檢測，并證明在規定的使用代次內其遺傳性狀是穩定的。減毒活**中所含病毒或細菌的遺傳性狀應與主種子批一致。

4) 菌毒種標簽上應至少標明菌毒種編號、名稱(chēng)、代次、批號、制備日期等內容。

5) 生產(chǎn)用菌毒種的存儲設備需滿(mǎn)足存儲需要，菌毒種保藏應當備份，且備份種子批應儲存于不同的地點(diǎn)或區域，在發(fā)生菌毒種儲存設備故障、自然災害等情況下，能夠采取有效應對措施。

6) 菌毒種應在規定的條件下專(zhuān)用設備保存，專(zhuān)人負責；出入庫應有規定和記錄。

7) 菌毒種存儲區域應當建立人員授權、進(jìn)出登記制度，避免非授權人員接觸菌毒種。

8) 菌毒種儲存溫度，應符合特定菌毒種的特征要求。儲存期間，應當對儲存條件進(jìn)行監控，并應當具備報警功能，確保菌毒種儲存條件符合要求。

9) 應對菌毒種工作種子批進(jìn)行穩定性考察，及時(shí)了解菌毒種儲存期間的質(zhì)量變化，考察可在**生產(chǎn)過(guò)程中同步進(jìn)行。

10) 菌毒種操作應在相應的生物安全級別下進(jìn)行。

11) 生產(chǎn)、科研及檢定用菌毒種應分開(kāi)存放，不得存放于同一設備。

生產(chǎn)用原輔料

**生產(chǎn)用原輔料管理應符合《中國藥典》三部“生物制品生產(chǎn)用原材料及輔料質(zhì)量控制規程”的規定，對原輔料進(jìn)行分級管理。原輔料檢查要點(diǎn)：

1) 供應商應當經(jīng)過(guò)評估與審計，供應商發(fā)生相關(guān)質(zhì)量事件時(shí)，應通過(guò)有效方式告知采購方。

2) 生產(chǎn)用主要原材料、輔料的質(zhì)量標準、取樣量及過(guò)程。

3) 關(guān)注生產(chǎn)用原輔料的入廠(chǎng)驗收、儲存條件、出入庫記錄、留樣等。

4) 動(dòng)物源性原輔料應有非疫區來(lái)源證明。

5) 產(chǎn)品配制用穩定劑（例如，糖類(lèi)、氨基酸、碳酸氫鈉、明膠等）、佐劑及稀釋劑（如氫氧化鋁、氯化鈉等）應符合相關(guān)質(zhì)量標準和內控標準（如微生物限度、細菌內毒素等）。

6) 配制培養基、培養液、生產(chǎn)過(guò)程中使用的原材料（例如，氨基酸、維生素、牛血清、抗生素、蛋白質(zhì)、無(wú)機鹽、碳水化合物等）和各種溶液應符合相應質(zhì)量標準；培養液及生產(chǎn)用溶液儲存條件與時(shí)間應經(jīng)過(guò)驗證。

7) 生物制品工藝過(guò)程中使用的動(dòng)物源性原輔料應證明無(wú)外源性或內源性病毒污染，分析方法應經(jīng)過(guò)驗證，其質(zhì)量標準和檢定方法應符合現行版藥典或相關(guān)的法規。

關(guān)鍵點(diǎn)

檢查要點(diǎn)

產(chǎn)品質(zhì)量回顧

1）品種工藝介紹（生產(chǎn)工藝流程圖，關(guān)鍵質(zhì)量屬性，關(guān)鍵工藝參數；如有變更，變更應符合相關(guān)注冊要求，變更前后的工藝比較、接受標準及工藝評估）。

2）菌毒種、細胞基質(zhì)的管理及使用情況（菌毒種、細胞的關(guān)鍵屬性的監測）。

3） 生產(chǎn)過(guò)程控制（關(guān)鍵工藝參數、中間產(chǎn)品、物料平衡、收率等）。

4）產(chǎn)品詳細的生產(chǎn)及檢驗情況（批號、菌毒種、批間一致性、產(chǎn)品產(chǎn)量的溯源情況列表）、批量、檢驗及批簽發(fā)情況。

5）成品的儲存和發(fā)運（存儲溫度和運輸溫度評價(jià)）。

6）產(chǎn)品的流向信息（成品的流向情況，包括原液批號、成品批號、數量、去向）。

7）關(guān)鍵質(zhì)量屬性分析（原液、半成品、成品關(guān)鍵質(zhì)量屬性的趨勢分析；穩定性考察趨勢分析）。

8）應對匯總的數據進(jìn)行分析，對產(chǎn)品的生產(chǎn)情況和質(zhì)量管理進(jìn)行總結，提出建議。

生產(chǎn)區污染控制

1) 應盡可能使用封閉系統提高無(wú)菌保障和隔離水平。在工藝中使用開(kāi)放系統時(shí)，應采取有效的控制措施，防止污染、交叉污染、混淆和差錯。

2) 應避免與產(chǎn)品直接接觸物品清洗/滅菌后的二次污染。

3) 取樣、加料、中間品轉運時(shí)，應確保各類(lèi)連接的無(wú)菌保障程度。

4) 關(guān)注生產(chǎn)用微生物活菌活毒區與非活菌活毒區的分區控制。活菌活毒區工器具傳出至非活菌活毒區之前，應充分滅活；滅活前、后工器具應分區放置，避免交叉污染；活菌活毒區與非活菌活毒區人流、物流通道應分開(kāi)設置；活菌活毒區與非活菌活毒區、滅活前與滅活后區域的凈化空調系統應分別設置，活菌活毒區應相對負壓。

5）中間產(chǎn)品、半成品的儲存容器變更，例如變?yōu)橐淮涡韵到y，應做變更控制、相容性試驗及穩定性試驗等研究工作，加強實(shí)物驗收和供應商審計。

QC實(shí)驗室管理

除對實(shí)驗室常規檢查外，還應重點(diǎn)關(guān)注**產(chǎn)品鑒別、效力試驗、特異性**試驗、病毒滴度、抗原含量檢測、宿主蛋白殘留、DNA殘留等。

1) 測定方法應進(jìn)行驗證或確認。

2) 新建立或改良的方法應進(jìn)行方法學(xué)驗證，還應與傳統方法進(jìn)行比較，并關(guān)注變更后方法的注冊合規性。

3) 標準品/參考品應可溯源。如自制工作標準品/參考品，應建立質(zhì)量標準，每批用法定標準品/參考品進(jìn)行標化并確定有效期。

4）應使用符合相關(guān)要求或級別的實(shí)驗動(dòng)物，除另有規定外，均應使用清潔級或清潔級以上的動(dòng)物；小鼠應來(lái)自封閉群動(dòng)物或近交系動(dòng)物。

5）動(dòng)物實(shí)驗人員應為專(zhuān)職人員，并應當經(jīng)過(guò)培訓。

6）實(shí)驗動(dòng)物應來(lái)源清晰。

共線(xiàn)生產(chǎn)管理

共線(xiàn)生產(chǎn)管理應符合《中國藥典》、《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規范》及其附錄中的相關(guān)規定。

在原液生產(chǎn)過(guò)程中有某些特定活生物體的階段，應當根據產(chǎn)品特性和設備情況，采取相應的預防交叉污染措施。

在產(chǎn)品分裝階段，使用同一分裝間、分裝設備分裝、凍干不同產(chǎn)品的，應當關(guān)注其防止交叉污染的措施。

1） 卡介苗與結核菌素應在獨立廠(chǎng)房?jì)壬a(chǎn)，嚴格分開(kāi)。

2） 炭疽桿菌、肉毒梭狀芽孢桿菌和破傷風(fēng)梭狀芽孢桿菌應在專(zhuān)用的設施內生產(chǎn)。

3） 減毒活**與滅活**、不同給藥途徑的**不能在同一分裝間、同一分裝凍干設施進(jìn)行分裝和凍干。

4） 對于共線(xiàn)生產(chǎn)的風(fēng)險評估報告，應包括人流和物流、微生物控制、活性物質(zhì)的理化特性、工藝特點(diǎn)、清潔工藝、環(huán)境監測、控制策略、殘留成分限度檢測能力評估等。

5） 關(guān)注防止交叉污染的措施（例如采用階段式生產(chǎn)、封閉系統、直接接觸產(chǎn)品的生產(chǎn)工具按品種專(zhuān)用、一次性使用系統等）。

6） 共用設施設備的清潔驗證。

7） 共線(xiàn)產(chǎn)品交叉污染控制效果評價(jià)（如年度報告）。

儲存和運輸

**的儲存和運輸應符合《**流通和預防接種管理條例》及其相關(guān)規定。

1） 冷庫、冷藏車(chē)及冷藏箱應根據國家要求及GSP標準進(jìn)行驗證，包括熱分布，斷電、開(kāi)門(mén)、外界環(huán)境等惡劣條件挑戰試驗。

2） **應實(shí)施效期預警管理，**應按照規定的發(fā)貨順序進(jìn)行發(fā)貨，無(wú)法在有效期內配送至接種單位的**不得進(jìn)入流通環(huán)節。

3） 如采用配送企業(yè)運送產(chǎn)品，應當符合上述有關(guān)規定，至少包括資質(zhì)審核、配送能力評估、簽訂儲存配送合同和質(zhì)量協(xié)議、配送企業(yè)資料備案等。

4） 發(fā)運記錄應完整，至少包括產(chǎn)品名稱(chēng)、規格、批號、數量、收貨單位和地址、聯(lián)系方式、發(fā)貨日期、運輸方式等。

5） 追溯體系應完整，應保證**最小包裝單位生產(chǎn)和銷(xiāo)售環(huán)節的可追溯性。

關(guān)鍵點(diǎn)

檢查要點(diǎn)

種子復蘇

工作代種子接種在適宜的培養基上，經(jīng)傳代擴增至規定代次和規模，獲得生產(chǎn)用種子。

1) 菌種或細胞種子遺傳穩定性確認。

2) 培養物做純菌檢查，確保種子培養液無(wú)污染。

3) 生產(chǎn)用種子代次應為批準的固定代次。

4) 生長(cháng)狀態(tài)觀(guān)察及生物學(xué)特征確認。

5) 應使用經(jīng)批準的培養基配方。

發(fā)酵培養和收獲

生產(chǎn)用種子按比例接種至大罐培養基發(fā)酵培養，根據細菌或細胞的生長(cháng)特性在發(fā)酵過(guò)程中適當補充所需的營(yíng)養物，控制培養溫度、攪拌速度、通氣量、通氣方式、罐壓等，同時(shí)監控溶氧、pH值、生長(cháng)濃度等。培養過(guò)程或培養結束取樣進(jìn)行純菌檢查。

1) 細胞培養時(shí)對照細胞外源因子檢測應符合規定。

2) 關(guān)注培養曲線(xiàn)及收獲期狀態(tài)（培養時(shí)間、培養濃度）；發(fā)酵培養的工藝驗證數據。

3) 收獲培養物純度、質(zhì)粒保有率（外源基因拷貝數）檢查。

4) 細胞培養所使用的生物源性物料（如牛血清、胰蛋白酶）的質(zhì)量控制及使用濃度。

5) 應使用經(jīng)批準的培養基配方。

6) 大罐培養過(guò)程中溶氧、pH值、溫度、攪拌速度和通氣量等參數的監測與記錄。

純化

將收獲的菌體或細胞經(jīng)適宜方法破碎，以過(guò)濾、離心超濾等方法去除菌體/細胞（或碎片），超濾后的料液進(jìn)行鹽析或凝膠吸附進(jìn)行粗純；使用密度梯度離心法、層析法等進(jìn)行精純。

1) 關(guān)注破碎、離心、深層過(guò)濾、超濾、鹽析等工序的各項質(zhì)量控制參數。

2) 柱層析工藝應對層析系統設備進(jìn)行驗證，包括系統設備關(guān)鍵傳感器的校驗（通常為紫外、電導、流速、pH等）、關(guān)鍵配件的更換標準或周期、系統清潔或消毒驗證等。

3) 密度梯度離心純化方法和柱層析純化方法的介質(zhì)使用次數和層析柱清潔方法等應進(jìn)行驗證。

4) 應驗證純化過(guò)程中所使用的表面活性劑和沉淀劑已有效去除。

5) 純化后如需進(jìn)行甲醛處理，應控制蛋白濃度、溫度、加入的甲醛濃度和作用時(shí)間。

6) 中間品的儲存方式、條件和儲存時(shí)限應經(jīng)過(guò)驗證。

原液制備

純化產(chǎn)物稀釋和除菌過(guò)濾后即為原液。

1) 應評估除菌過(guò)濾前藥液微生物負載狀況，除菌濾芯在使用前后應進(jìn)行完整性檢測。

2) 關(guān)注抗原收獲率，包括收獲率控制范圍。

3) 原液應進(jìn)行無(wú)菌檢查、蛋白質(zhì)濃度、特異蛋白帶、純度、細菌內毒素、末端氨基酸序列等檢查；重組細胞株生產(chǎn)的原液還應關(guān)注牛血清白蛋白殘留量、細胞DNA殘留量、細胞蛋白殘留量測定。

關(guān)鍵點(diǎn)

檢查要點(diǎn)

菌種培養

菌種培養是指工作種子批菌種經(jīng)過(guò)復蘇、傳代擴增至規定代次和規模，獲得生產(chǎn)用種子用于大罐（發(fā)酵）培養。"

1) 菌種傳代期間，應進(jìn)行純菌檢查或染色鏡檢以確保用于擴大培養的種子無(wú)污染。

2) 培養條件應控制溫度、時(shí)間、二氧化碳濃度等參數，液體培養的應考慮攪拌及通氣。

3) 可采取鏡檢、OD值測定、pH值測定、絮狀單位測定等方法對細菌的生長(cháng)狀態(tài)進(jìn)行觀(guān)察。

4) 應使用經(jīng)批準的培養基配方。

發(fā)酵培養

生產(chǎn)用種子按規定的比例接種至大罐培養基，采用合適的培養條件，在培養過(guò)程中應取樣進(jìn)行純菌檢查或染色鏡檢，以保證沒(méi)有雜菌污染。"

1) 生產(chǎn)用種子應為批準的固定代次。

2) 應使用經(jīng)批準的培養基配方。

3) 大罐培養過(guò)程中溶氧、pH值、溫度、攪拌速度和通氣量等參數的監測與記錄。

4) 培養過(guò)程中細菌濃度、抗原滴度、血凝滴度、絮狀單位的檢測和確認。關(guān)注細菌的生長(cháng)曲線(xiàn)及收獲期狀態(tài)。

5) 培養物殺菌溫度、時(shí)間、攪拌速度、殺菌劑濃度的控制和確認。

6) 對發(fā)酵罐（系統）各項功能（參數控制、數據采集等）進(jìn)行驗證和確認。

7) 發(fā)酵結束后發(fā)酵罐的清洗、消毒的驗證及確認。

殺菌與多糖收獲

細菌性多糖**是指采用各種生物技術(shù)提取細菌的莢膜多糖抗原，經(jīng)純化后加入適宜的穩定劑制造而成的**。

大罐培養結束后進(jìn)行殺菌，一般采用甲醛殺菌，如傷寒沙門(mén)氏菌、腦膜炎球菌以及b型流感嗜血桿菌；也可采用脫氧膽酸鈉溶液或冷酚溶液進(jìn)行殺菌，如肺炎球菌。殺菌后，采用離心法或其他合適方法去除菌體，收集上清液提取多糖。

1) 培養終點(diǎn)（時(shí)間、細菌濃度、pH值等）的確定，并進(jìn)行純菌檢查。

2) 殺菌方法驗證、殺菌劑加入量及相關(guān)參數如溫度、時(shí)間、攪拌速度的控制與確認。

3) 關(guān)注人員操作規范和活菌操作區生物安全防護措施。

多糖純化

多糖純化包括多糖粗制和多糖精制過(guò)程。

1) 關(guān)注多糖粗制、精制過(guò)程的控制參數。

2) 粗制多糖、精制多糖的存放條件和效期，應有驗證數據支持。

3) 關(guān)注共用生產(chǎn)設備的清潔和避免交叉污染的措施。

4) 純化過(guò)程中通常會(huì )使用多種有機溶劑，關(guān)注有機溶劑的使用及去除驗證和監測。

原液制備

多糖**的原液是指將干燥后冷凍保存的精制多糖，用滅菌注射用水或滅菌磷酸鹽緩沖液溶解，再經(jīng)除菌過(guò)濾之后獲得的**中間品，稱(chēng)作多糖原液，對于多價(jià)**則稱(chēng)為混合前單價(jià)多糖原液。

1) 關(guān)注原液批號，尤其對于多價(jià)**的各型抗原，應有防止批號混淆、出錯的預防措施。

2) 原液保存溫度、保存條件（避光、防潮）和效期，應進(jìn)行驗證。

關(guān)鍵點(diǎn)

檢查要點(diǎn)

殺菌及毒素收獲

大罐培養結束、純菌檢查合格后，向培養液中加入適宜濃度的殺菌劑殺菌，按批準的工藝進(jìn)行純化或脫毒。

1) 應對毒素效價(jià)（絮狀單位）、血凝滴度、細菌濃度等進(jìn)行監測，并確定培養終點(diǎn)。

2) 關(guān)注人員活菌操作區生物安全防護措施。

3) 殺菌方法應經(jīng)過(guò)驗證（殺菌方法具體參數：殺菌劑、濃度、時(shí)間）。

4) 毒素效價(jià)、血凝滴度檢測方法應經(jīng)過(guò)實(shí)驗室適用性確認。

毒素精制純化

應用經(jīng)批準的方法對收獲液純化得到精制毒素。一般多采用硫酸銨鹽析、蔗糖密度梯度離心、透析或超濾等方法。

1) 毒素純化方法驗證。

2) 硫酸銨添加方式、濃度、鹽析時(shí)間的控制和確認。透析或超濾后殘留硫酸銨的測定。

3) 過(guò)濾方式、設備、材質(zhì)、孔徑的選擇和確認，過(guò)濾操作參數的控制和確認。

4) 離心溫度、轉速和時(shí)間的控制和確認，蔗糖密度梯度離心需對蔗糖濃度的確認。

5) 中間品的儲存方式、條件和儲存時(shí)限應經(jīng)過(guò)驗證。

脫毒及類(lèi)毒素制備

精制抗原/毒素需對**組份進(jìn)行脫毒，脫毒劑包括甲醛、戊二醛等。脫毒并去除脫毒劑后即為精制類(lèi)毒素。

1) 脫毒時(shí)抗原/毒素濃度的控制和確認。

2) 脫毒劑的添加順序、濃度及加入比例的控制和確認。

3) 脫毒溫度、時(shí)間控制和確認。

4) 脫毒試驗結果的確認。

5) 去除脫毒劑的方法應經(jīng)過(guò)驗證。

6) 中間品的儲存方式、條件和儲存時(shí)限應經(jīng)過(guò)驗證。

類(lèi)毒素原液制備

將精制類(lèi)毒素中根據工藝要求加入適宜防腐劑，經(jīng)過(guò)除菌過(guò)濾，即為精制類(lèi)毒素原液。

1) 原液保存條件和效期應經(jīng)過(guò)驗證。

2) 關(guān)注原液質(zhì)量標準和檢測結果，尤其是**逆轉試驗、效價(jià)試驗、絮狀單位、純度、無(wú)菌檢查、特異性**檢查。

關(guān)鍵點(diǎn)

檢查要點(diǎn)

多糖抗原制備

多糖抗原的制備及其工藝檢查要點(diǎn)，參考“細菌性多糖**”章節。

載體蛋白制備

用于結合**的載體蛋白，目前已知的有破傷風(fēng)類(lèi)毒素TT、白喉類(lèi)毒素DT、無(wú)毒的白喉突變株毒素CRM197、B群腦膜炎球菌外膜蛋白復合物OMP等。

類(lèi)毒素載體蛋白的生產(chǎn)工藝（破傷風(fēng)類(lèi)毒素和白喉類(lèi)毒素）基本相同，采用柱色譜法或其他經(jīng)批準的方法對精制類(lèi)毒素原液進(jìn)一步純化，并配制至適宜濃度即成載體蛋白。重組表達的載體蛋白檢查要點(diǎn)可參考重組類(lèi)**。

1）載體蛋白各項質(zhì)量指標應符合《中國藥典》與產(chǎn)品注冊標準的要求，尤其應注意載體蛋白的純度。

2）純化過(guò)程關(guān)鍵工藝參數的控制，柱層析工藝應對層析介質(zhì)、緩沖液離子強度（鹽濃度）和pH值、流速及壓力、平衡體積、上樣量、收樣范圍等進(jìn)行控制。

3）明確規定層析柱的合格標準及使用壽命，層析柱的清潔或消毒、保存和再生的驗證。

4）柱層析工藝應對層析系統設備進(jìn)行驗證，包括系統設備關(guān)鍵傳感器的校驗（通常為紫外、電導、流速、pH等）、關(guān)鍵配件的更換標準或周期、系統清潔或消毒驗證等。

結合物制備

多糖抗原與載體蛋白之間的結合是利用多糖和蛋白分子中存在的羧基、半縮醛、氨基/亞氨基、巰基/二硫鍵、羥基等功能鍵，通過(guò)共價(jià)結合完成的。目前常見(jiàn)的方法是溴化氰（CNBr）活化法和還原氨基化法等方法。多糖抗原與載體蛋白的結合反應結束后，將結合反應混合物用適宜的液體透析或超濾透析，即獲得多糖蛋白結合物。

1) 應建立測定多糖活化或/和蛋白活化程度的方法、關(guān)鍵參數的控制。

2) 采用透析或超濾工藝去除多糖衍生物、蛋白衍生物中殘留的化學(xué)試劑應進(jìn)行驗證。

3) 關(guān)注劇毒化學(xué)試劑管理。

4) 衍生物、結合物保存條件和時(shí)間應進(jìn)行驗證。

結合物純化與原液制備

多糖結合物經(jīng)柱層析等方法純化得到結合物原液。

1) 層析柱純化方法、介質(zhì)使用次數（即壽命）、層析柱清潔方法等應進(jìn)行驗證。

2) 原液的儲存方式、條件和儲存時(shí)限應經(jīng)過(guò)驗證。

3) 關(guān)注原液檢測結果，尤其是多糖含量、多糖與蛋白質(zhì)比值、高分子結合物含量或游離多糖含量、細菌內毒素含量、化學(xué)試劑殘留量等。

關(guān)鍵點(diǎn)

檢查要點(diǎn)

半成品

1) 半成品各組分（如原液、佐劑、穩定劑、稀釋液、防腐劑等）實(shí)際加入量應與計算量一致。

2) 佐劑配制及儲存應經(jīng)過(guò)驗證，并有質(zhì)量標準及穩定性數據。

3) 吸附過(guò)程應進(jìn)行控制，并明確控制指標。

4) 各組分的加入順序應符合工藝要求，并按經(jīng)過(guò)驗證的參數（如轉速、攪拌時(shí)間等）混合，確保半成品均一性。

5) 半成品需要存放的，應保存在合適的容器中并按經(jīng)過(guò)驗證的條件（如溫度、時(shí)間）下儲存。

6) 半成品轉運應采取有效措施（如溫度、時(shí)間、密封性等）控制質(zhì)量（包括無(wú)菌、有效物質(zhì)含量等）。

7) 對于混懸狀或含有佐劑的**產(chǎn)品，還應當關(guān)注分裝過(guò)程中的產(chǎn)品的均一性。

8) 對溫度較為敏感的**制品，關(guān)注分裝過(guò)程中的對產(chǎn)品溫度的控制措施。

9) 半成品配制、分裝及軋蓋應在規定的時(shí)限內完成。

10) 關(guān)注分裝后剩余半成品及活菌活毒區污物的滅活處理措施。

11) 應按要求對制品進(jìn)行燈檢，使用自動(dòng)燈檢機進(jìn)行燈檢前，應進(jìn)行燈檢功能測試。

12）關(guān)注產(chǎn)品生產(chǎn)過(guò)程中脫冷鏈時(shí)間與穩定性支持數據。