無(wú)菌控制對于發(fā)酵是需要直面的問(wèn)題，對于生物實(shí)驗室也應是管理中的重要一項，這關(guān)乎到實(shí)驗效率、實(shí)驗結果判斷等。下面結合個(gè)人的經(jīng)驗與理解，從布局、環(huán)境控制、操作、強化理解與解決偏差，談?wù)勆飳?shí)驗室無(wú)菌控制的一些經(jīng)驗。
一、布局
實(shí)驗室在設計時(shí)就需要根據現有及將來(lái)可能的情況而充分考慮布局。合理的人流可減少可能的污染及交叉污染。分子區、發(fā)酵區與公共區應該盡可能地分離，超凈臺最好在獨立隔離間而盡量避免放置于門(mén)口，以減少使用時(shí)外部風(fēng)的回灌可能；潔具與垃圾桶不應該放置于上風(fēng)口；水電需一次性考慮到位，減少水的滴漏與排水堵塞，降低每次停電的影響與過(guò)多的操作；冰箱與烘箱，與滅菌鍋應該盡量遠離；試劑配置、攪拌溶解與調pH又需在臨近區域。
搖床考慮不同溫度外，還需要配備專(zhuān)用的與可以臨時(shí)混用的搖床；放置搖床區域應該比較獨立，需要考慮周?chē)h(huán)境的排風(fēng)換氣能力與散熱效果，一般放置在通風(fēng)較好的環(huán)境下。
發(fā)酵罐配套的壓縮機的采風(fēng)口需要靠近上風(fēng)口；發(fā)酵罐的排氣不影響其他。
二、環(huán)境控制
人始終是可能的最大污染源，需從工作服的清洗、穿戴，消毒液的配置與更換，手的消毒開(kāi)始關(guān)注每一步驟。無(wú)菌操作前，得注意鞋口、袖口、領(lǐng)口與帽口鎖緊，在超凈臺操作前需等待2-3分鐘，讓氣流穩定；操作過(guò)程中，盡量避免雙手交叉、物品之間相互觸碰，另外其他人走路時(shí)也盡量慢一些使周?chē)h(huán)境不因走動(dòng)速度過(guò)快而起風(fēng)；操作后及時(shí)清潔。
桌子及臺子需經(jīng)常擦拭，避免灰塵與死角；超凈臺利用前后得擦拭消毒；其他物品的擺放，一般要求是用與放都得順手，標識后定置放置。
移液槍如不滅菌，盡量是各實(shí)驗獨立一套，并按其要求及時(shí)維護；其他設備按要求定期維護；垃圾桶及時(shí)傾倒，活性物質(zhì)滅活處理；下水道及水池周邊無(wú)污漬沉積，并定期用次氯酸鈉或者新潔爾滅、酒精等消毒劑噴灑消毒。
三、操作
操作一定按照老師所教導的方法操作，前期最好是“復制式操作”，即老師如何教就如何做；最好是“目觸及式操作”，即眼睛緊盯操作，“手隨目轉”。這個(gè)過(guò)程需要“專(zhuān)心”地學(xué)，“細心”地練習，經(jīng)歷一個(gè)反復練習、熟能生巧直到獨立操作的過(guò)程。
滅菌鍋使用時(shí)盡量不要裝太滿(mǎn)，各物品裝袋子時(shí)也盡量不要裝太滿(mǎn)，以保障滅菌效果。特別要注意滅菌后物料擰蓋時(shí)機與物料遇冷后首次開(kāi)蓋時(shí)的操作；特別要注意不同材質(zhì)的物料滅菌后在外部降溫時(shí)的風(fēng)險與操作。
四、強化理解
無(wú)菌控制需要提升對各方面的理解。老師為什么要這么操作？滅菌工藝為什么是這樣？滅菌前物料的包裝與滅菌后拆包裝的操作為什么是這樣？為什么要注意這些細節？何為無(wú)菌風(fēng)險？結合所學(xué)知識，延展及探究環(huán)境消毒，各種菌的生長(cháng)習性，就開(kāi)始有系統化的無(wú)菌控制思維。
五、解決偏差
無(wú)菌控制是糾偏與預糾偏結合的技術(shù)，如發(fā)現有染菌，及時(shí)地分析出雜菌種屬及來(lái)源，針對性地分析原因與解決。解決無(wú)菌偏差可能需要更多更深更系統的知識，偏差出現后分析是什么菌，如何通過(guò)性狀或者16S檢測判定，而又如何找到確定的來(lái)源，最后如何解決與避免，這又是知識、經(jīng)驗與能力的體現。
再預防性地發(fā)現相關(guān)問(wèn)題，如設備異響就需要做臨時(shí)性檢查；突然停水、電之后就及時(shí)系統檢查等等。
總之，提前考慮布局，做好強化環(huán)境控制，穩定操作實(shí)踐，加強系統化理解，提升解決偏差的能力，方可直面生物實(shí)驗室的無(wú)菌控制。
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