概述

       前沿技術(shù)迅速發(fā)展，取得突破性進(jìn)展。以腺相關(guān)病毒（AAV）為載體的基因治療和siRNA藥物都有第二個(gè)藥物獲批上市，標志著(zhù)技術(shù)的成熟應用。CRISPR和iPSC等技術(shù)在2019年取得重大突破，向臨床應用邁出了重要的一步。

       新興技術(shù)嶄露頭角，著(zhù)眼治療新疾病。囊性纖維化藥物的上市，象征著(zhù)人類(lèi)又攻克了一種絕癥。亨廷頓舞蹈癥新治療技術(shù)和死亡大腦的恢復為治療目前醫學(xué)仍然束手無(wú)策的疾病帶來(lái)了新的曙光。

       CRISPR基因編輯

       CRISPR是非常有潛力的前沿熱點(diǎn)技術(shù)，其本身可以作為治療方式，也可用于細胞治療、藥物篩選。2019年，CRISPR領(lǐng)域產(chǎn)生了數個(gè)突破性進(jìn)展。

       David Liu教授于2016年開(kāi)發(fā)的基于CRISPR技術(shù)的單堿基編輯器（ABE）是該領(lǐng)域的革命性技術(shù)，該技術(shù)能在不依賴(lài)DNA雙鏈斷裂的情況下，實(shí)現對單個(gè)堿基的定向修改，降低潛在風(fēng)險。然而，2019年3月，多篇論文報道單堿基編輯會(huì )由于脫靶誘導大量基因突變。

       2019年10月，David Liu團隊公布了一種先導編輯（Prime editing）技術(shù)，通過(guò)一系列ABE蛋白突變體，最大限度地減少了該技術(shù)的脫靶效應。該技術(shù)突破使CRISPR到臨床應用邁進(jìn)了一大步，大大擴展了基因組編輯的范圍和能力，原則上可以糾正約89％的已知致病性人類(lèi)遺傳變異。

       2019年11月，在美國進(jìn)行的首個(gè)CRISPR療法臨床試驗公布陽(yáng)性數據。CRISPRTherapeutics和VertexPharmaceuticals的CRISPR/Cas9基因編輯療法CTX001，在1/2期臨床試驗中取得積極中期數據。一名輸血依賴(lài)性β地中海貧血癥（TDT）患者和一名嚴重鐮狀細胞貧血癥（SCD）患者在接受治療后，均達到停止依賴(lài)輸血的效果。CTX001通過(guò)CRISPR技術(shù)，增加從患者體內獲取的造血干細胞表達胎兒血紅蛋白（HbF）的能力，然后將經(jīng)過(guò)改造的造血干細胞注回患者體內，彌補患者成人血紅蛋白的功能缺陷，從而緩解患者癥狀。

       北大鄧宏魁教授致力于利用CRISPR技術(shù)清除HIV，研究團隊為感染HIV的一例急性淋巴細胞白血病患者選擇了一名HLA匹配的干細胞移植供者，隨后用CRISPR/Cas9技術(shù)對供者干細胞進(jìn)行了基因組編輯，敲除CCR5，之后輸入感染HIV的受者體內。相關(guān)結果2019年6月發(fā)表在《新英格蘭醫學(xué)雜志》上。

       以AAV病毒為載體的基因治療

       2019年5月，治療脊髓性肌萎縮癥（SMA）的基因療法Zolgensma上市，該療法以AAV為載體，是FDA批準的第二款病毒載體基因療法。第一款病毒載體基因療法Luxturna于2017年獲批，代表該療法具有實(shí)用價(jià)值，第二款同類(lèi)療法的獲批則意味著(zhù)該療法走向成熟。Zolgensma也是第一款全身性遞送的腺相關(guān)病毒（AAV）載體基因療法，標志著(zhù)基于A(yíng)AV載體的基因療法技術(shù)在安全性、耐受性和特異性上新的突破。Biomarin的以AAV為載體的治療血友病的基因療法已向歐洲藥品管理局（EMA），有望于明年上市，造福廣大血友病患者。屆時(shí)，該療法將實(shí)現從針對小眾疾病到大適應癥的突破。

       siRNA（小干擾RNA）

       2019年11月，繼去年首個(gè)siRNA藥物ONPATTRO（patisiran）上市，Alnylam的siRNA藥物Givlaari（givosiran）獲批上市，用于成人急性肝卟啉癥（AHP）的治療。此前，Givlaari獲EMA和FDA孤兒藥認定、EMA快速審批程序資格、FDA突破療法，是治療AHP的全球首款批準藥物。

       首個(gè)siRNA藥物ONPATTRO，治療hATTR淀粉樣變性，療效優(yōu)于反義核苷酸藥物Tegsedi。Givlaari是第二款獲批的siRNA藥物，首次使用了基于GalNAc修飾的siRNA療法制造技術(shù)，標志著(zhù)siRNA療法成為反義核苷酸之后核酸藥物領(lǐng)域的又一成熟技術(shù)。Alnylam的另一款siRNA藥物inclisiran已公布治療家族性高膽固醇血癥（HeFH）的臨床III期陽(yáng)性數據，有望明年獲批上市。

       iPSC（誘導多能干細胞）

       自山中伸彌發(fā)明iPSC技術(shù)并獲得諾貝爾獎以來(lái)，iPSC一直是細胞治療領(lǐng)域的熱點(diǎn)，該技術(shù)解除了細胞來(lái)源的限制，有巨大的潛能。日本仍然在iPSC領(lǐng)域引領(lǐng)前沿，已將iPSC應用于黃斑變性、脊髓損傷、帕金森病、角膜疾病等適應癥的臨床治療。2019年9月，日本科研團隊將iPSC制成角膜，移植到視力衰退的女性中，另外還有一種iPSC細胞被批準作為脊髓損傷的療法。

       2019年12月，美國國立眼科研究所（NEI）宣布正在開(kāi)展一項臨床試驗，測試基于自體iPSC的一種新型療法治療地理萎縮（geographic atrophy）的安全性，地理萎縮是干性年齡相關(guān)性黃斑變性（AMD）中惡化程度較高的一種。該試驗是美國首例使用患者來(lái)源的誘導性多能干細胞（iPSC）替代組織的臨床試驗。

       2019年9月，FDA批準了iPSC來(lái)源的CAR-NK療法用于臨床試驗。該療法是Fate Therapeutics公司的細胞治療產(chǎn)品，靶向多種腫瘤相關(guān)抗原。由iPSC制成的CAR-NK可能成為通用型療法，其應用是iPSC與免疫細胞治療結合的重大突破。

       免疫細胞治療

       2019年，以CAR-T為首的免疫細胞治療領(lǐng)域依舊火熱，涌現了不少突破性進(jìn)展。倫敦大學(xué)學(xué)院的開(kāi)發(fā)了與CD19低親和力的CAT CAR-T療法，不容易過(guò)度激活人體內的免疫細胞，但卻能夠讓T細胞的攻擊力更強。臨床數據表明CAT CAR-T與傳統的CAR-T相比，細胞擴增增強，**更低，且沒(méi)有嚴重的CRS。

       2019年9月，來(lái)自中美多家機構的研究人員公開(kāi)了首個(gè)靶向癌細胞上表達的B細胞活化因子受體（BAFF-R）的CAR-T細胞，根除了動(dòng)物模型中對CD19靶向療法產(chǎn)生抵抗性的人白血病細胞和淋巴瘤細胞。這種新療法將于明年在臨床試驗中用于治療在接受CD19免疫療法治療后出現癌癥復發(fā)的患者，并有可能用作一線(xiàn)的CAR-T細胞免疫療法。

       近兩年，免疫細胞治療針對實(shí)體瘤的研究比例逐漸升高，2019年的統計數據顯示，在活躍的臨床前細胞療法中，有242個(gè)是專(zhuān)門(mén)為實(shí)體瘤設計的，有172個(gè)是針對血液瘤的，這說(shuō)明細胞療法正在逐漸將目標轉向實(shí)體瘤。在實(shí)體瘤方面，研究人員設計出了一種利用**增強CAR-T實(shí)體瘤療效的方法，這種**能顯著(zhù)增加抗腫瘤T細胞的數量，并使這些細胞有力地侵入實(shí)體瘤。小鼠研究顯示，CAR-T療法聯(lián)合“強化**”可完全清除60%動(dòng)物體內的實(shí)體腫瘤，而單獨使用CAR-T療法幾乎沒(méi)有任何抗癌效果。

       TIL療法也是對抗實(shí)體瘤的生力軍，在今年取得良好進(jìn)展。Iovance公司的TIL療法lifileucil和LN-145在2019年ASCO年會(huì )上公布了臨床數據，分別在治療黑色素瘤和宮頸癌患者的臨床試驗中表現出優(yōu)異的療效。

       Lifileucil在接受過(guò)多種療法治療的轉移性黑色素瘤患者中，達到38%的客觀(guān)緩解率和80%的疾病控制率。LN-145療法在治療宮頸癌患者時(shí)達到44%的緩解率和11%的完全緩解率，獲得了FDA授予的突破性療法認定。該公司計劃在2020年遞交lifileucil和LN-145的生物制劑許可申請（BLA）。

       干細胞療法治愈HIV

       2019年3月，一名患者的白細胞通過(guò)干細胞移植被替換為具有HIV抵抗力的白細胞，隨后該患者體內的HIV被清除。早在2009年就有報道，一名白血病患者在骨髓移植后，發(fā)現體內的HIV被清除，即著(zhù)名的“柏林患者”。這是在英國的第二例HIV陽(yáng)性患者，由于霍奇金氏淋巴瘤的診斷，在接受干細胞移植后血液瘤緩解，并發(fā)現HIV被清除。

       類(lèi)似于“柏林患者”案，此次移植的供體細胞也帶有CCR5突變。案例表明，“柏林患者”并不是一個(gè)孤立的案例，它為數百萬(wàn)艾滋病毒患者帶來(lái)了希望。HIV的治愈方法可能很快就會(huì )出現，并且可能只需要移植帶有CCR5突變攜帶細胞的移植物即可。

       囊性纖維化藥物

       2019年10月，創(chuàng )新療法Trikafta（elexacaftor/tezacaftor和ivacaftor）獲FDA批準上市，可以治療90%囊性纖維化患者。這一組合療法被列入《科學(xué)》雜志2019年重磅科學(xué)新聞“年度突破”候選名單。

       囊性纖維化（cysticfibrosis）是一種罕見(jiàn)的、縮短壽命的遺傳性疾病，該病會(huì )使患者肺部等器官積聚異常粘稠的粘液，引起慢性肺部感染和進(jìn)行性肺損傷，并最終導致死亡。囊性纖維化長(cháng)期無(wú)特效藥物，曾被視為絕癥。2012年，首個(gè)治療囊性纖維化的藥物Kalydeco（ivacaftor）上市，但只有大約4%的患者獲益。Trikafta三聯(lián)療法的獲批使囊性纖維化的治愈率達到90%，象征著(zhù)又一絕癥被人類(lèi)攻克。

       Siglectin-15抗體

       Siglectin-15是繼PD-1/PD-L1后又一重磅免疫檢查點(diǎn)分子，由PD-1抗體發(fā)現者之一陳列平教授鑒定與開(kāi)發(fā)，并成立了Nextcure公司開(kāi)展相關(guān)產(chǎn)業(yè)轉化。

       2019年11月，Siglec-15單抗NC318的Ⅰ期臨床試驗結果更新：NC318在10例可評估PD-1耐藥非小細胞肺癌患者中ORR為20%（2/10），其中包含1例CR，1例PR，并且安全性良好。由于該利好結果，Nextcure公司股票大漲248%。

       由于Siglec-15和PD-L1的表達是互斥的，預示著(zhù)Siglec-15抗體有可能在PD-1/PD-L1抗體治療無(wú)響應的患者身上有效，能夠彌補PD-1/PD-L1療法的不足，因此醫藥行業(yè)對于NC318成為下一個(gè)PD-1寄予厚望。而NC318單藥治療數據極為可觀(guān)，患者耐受性也十分良好。結果基本和免疫檢查點(diǎn)抑制劑藥物PD-1單抗早期試驗的數據接近。

       “小分子膠水”治療亨廷頓舞蹈癥

       2019年10月，復旦大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院魯伯塤與丁澦課題組和復旦大學(xué)信息科學(xué)與工程學(xué)院光科學(xué)與工程系費義艷課題組等多學(xué)科團隊通力合作，開(kāi)創(chuàng )性地提出基于自噬小體綁定化合物（ATTEC）的藥物研發(fā)原創(chuàng )概念，并巧妙地通過(guò)基于化合物芯片和前沿光學(xué)方法的篩選，發(fā)現了特異性降低亨廷頓病致病蛋白的小分子化合物。研究團隊將該化合物稱(chēng)之為“小分子膠水”，能夠直瞄靶心，牢牢地將自噬相關(guān)蛋白LC3及亨廷頓（HTT）蛋白黏在一起，進(jìn)而將HTT蛋白包裹進(jìn)入自噬小體進(jìn)行降解。同時(shí)，該“小分子膠水”只靶向突變的HTT蛋白，并不黏附野生型HTT蛋白，使其得以安然無(wú)恙。

       亨廷頓舞蹈癥的分子機理還不十分明確，尚缺少特效治療藥物，該技術(shù)創(chuàng )新為亨廷頓病的臨床治療帶來(lái)新的曙光。

       人工系統恢復死亡數小時(shí)后的豬腦

       2019年4月，耶魯大學(xué)科學(xué)家研究報道，將分離的豬大腦在死亡數小時(shí)后，連接到BrainEx系統，該系統可在正常體溫下（37℃）模擬脈動(dòng)血流，將含氧人工物質(zhì)灌注豬腦。灌注成功地恢復腦組織中的循環(huán)，也導致了神經(jīng)元結構的保存，包括海馬區細胞的保存。

       令人驚訝的是，與BrainEx的連接還有助于恢復神經(jīng)元的電活動(dòng)和炎癥反應。此外，神經(jīng)元還能夠利用氧氣并代謝葡萄糖。但是，灌注并不能恢復意識或知覺(jué)等較復雜的神經(jīng)元功能，也沒(méi)有發(fā)現全腦活動(dòng)與功能。然而，這項研究確實(shí)提升了人類(lèi)對大腦科學(xué)的認知，挑戰了我們關(guān)于死亡意義及其與復雜腦功能的關(guān)系的認識，也為相關(guān)研究提出了新的倫理需求。此外，本研究提出了一種重要的技術(shù)工具，為大腦功能的恢復提供了技術(shù)可能性。