俗話(huà)說(shuō)，“豬糧安天下”，生豬產(chǎn)業(yè)是關(guān)系國計民生的重點(diǎn)產(chǎn)業(yè)。經(jīng)過(guò)一年的努力，目前我國非洲豬瘟疫情勢頭總體減緩，養豬場(chǎng)戶(hù)信心逐步增強，接下來(lái)將以非洲豬瘟疫情防控和恢復生豬生產(chǎn)為重點(diǎn)任務(wù)。而在非洲豬瘟疫情防控、非洲豬瘟實(shí)驗室檢測工作的過(guò)程中，低速離心機等檢測儀器設備將受到高度的關(guān)注。
在低速離心機的使用過(guò)程中，如何正確操作是關(guān)鍵。對此，上海盧湘儀對檢驗新型非洲豬瘟的操作步驟，包括檢測前準備工作、實(shí)驗所需自備試驗器材、新型非洲豬瘟檢驗儀樣本處理及要求、新型非洲豬瘟檢驗儀操作步驟進(jìn)行了解答。
檢測前準備工作
1、請提前20分鐘從冰箱中取出新型非洲豬瘟檢驗儀試劑盒，平衡至室溫。
2、從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結晶，屬于正常現象；放置室溫，輕搖均勻，待結晶完全溶解后再配置洗滌液。可將20ml濃縮洗滌液用蒸餾水或去離子水稀釋配置成400ml工作濃度的洗滌液，未用完的放回4℃。
3、需要做20×洗滌緩沖液的稀釋?zhuān)赫麴s水按1：20稀釋?zhuān)?份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。
實(shí)驗所需自備試驗器材
1.新型非洲豬瘟檢驗儀(450nm)
1.高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.準備37℃恒溫箱或水浴鍋
4.蒸餾水或去離子水
新型非洲豬瘟檢驗儀樣本處理及要求
1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清，保存過(guò)程中如出現沉淀，應再次離心。
2.血漿：應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應該再次離心。
3.新型非洲豬瘟檢驗儀尿液：用無(wú)菌管收集，離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4.細胞培養上清：檢測分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時(shí)，用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應再次離心。
5.新型非洲豬瘟檢驗儀組織標本：切割標本后，稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4)，用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
6.標本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻進(jìn)行，提取后應盡快進(jìn)行實(shí)驗。若不能馬上進(jìn)行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融。
7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
新型非洲豬瘟檢驗儀操作步驟
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置陰、陽(yáng)性對照孔和樣本孔，陰、陽(yáng)性對照孔中加入陰性對照、陽(yáng)性對照各50μL。
3.待測樣本孔加待測樣本10μL，樣本稀釋液40μL。
4.隨后陰、陽(yáng)性對照孔和樣本孔中每孔加入新型非洲豬瘟檢驗儀辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標記的檢測抗原100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿(mǎn)新型非洲豬瘟檢驗儀洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光水浴鍋孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內，在新型非洲豬瘟檢驗儀450nm波長(cháng)處測定各孔的OD值。
作為在美國獲得FDA認證的中國離心機企業(yè)，上海盧湘儀目前已經(jīng)通過(guò)了ISO9001：2015質(zhì)量體系認證和ISO13485：2003質(zhì)量體系認證以及CE認證，企業(yè)從設備的生產(chǎn)制造、銷(xiāo)售、到售后服務(wù)形了完整體系，旗下離心機產(chǎn)品更是出口到美國、德國、英國、加拿大、泰國等30多個(gè)國家。“不斷創(chuàng )新，面向未來(lái)”是盧湘儀追求的目標，企業(yè)將竭盡全力，向用戶(hù)提供高質(zhì)量的產(chǎn)品和服務(wù)，并愿與國內外企業(yè)建立廣泛的技術(shù)合作關(guān)系！
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