N-Glycan聚糖標(biāo)簽，質(zhì)譜級(jí)
訂貨號(hào) 產(chǎn)品名稱 包裝/pkg
HLS GLAB01W N-聚糖標(biāo)簽-W 4.5mg
HLS DMF001 ??DMF 200ul
說明：?于N-linked糖蛋?(包括抗體)經(jīng)過PNGase F糖苷酶酶切后溶液中聚糖的超快速標(biāo)記。 標(biāo)記后的聚糖具有靈敏的熒光和質(zhì)譜離?
化特性。使?LC-FLR or LC-MS的定量分析檢測(cè)。該試劑獨(dú)特的化學(xué)屬性提供了更?的熒光定量和最?的質(zhì)譜響應(yīng)。
物理形態(tài)：凍?粉；分?量：427.1850Da；分?式：C21H25N505
標(biāo)記的糖胺的質(zhì)量偏移數(shù)：+C17H20N402=312.3663Da
Labeled N-Glycan(Da) = Released N-Glycan + Glycan Label Reagent - Reaction by-product(C4H5N103, MW:115.0268)- H
聚糖標(biāo)簽溶解：55ul??DMF溶解4.5mg Glycan Label 即濃度=82ug/ul(現(xiàn)?現(xiàn)配)
??DME(HLSDMF001)：只?于聚糖標(biāo)簽?粉試劑的溶解和標(biāo)記后樣品的稀釋
儲(chǔ)存條件：凍?粉存儲(chǔ)在-20°C冰箱，有效期見產(chǎn)品標(biāo)簽；保質(zhì)期：24?在-20°C
適?范圍：每瓶4.5mg標(biāo)簽試劑溶解后可以標(biāo)記5個(gè)酶切后的聚糖樣品
推薦的N-聚糖標(biāo)記SOP：
-取10ul 1.5 ug/ul mAb脫鹽樣品加?0.6ml低蛋?吸附離?管
-加10ul 3% BT Surfactant w/5mM TCEP 變性還原緩沖液(50mM HEPES，PH=7.9)混勻;
-?浴95°C 加熱3min；然后冷卻?室溫
-加10ul 1.5 unit/ul rPNGase F糖苷酶混勻，?浴50°C孵育15-30min；然后冷卻?室溫
-加10ul 82 ug/ul Glycan Label標(biāo)簽試劑混勻，室溫反應(yīng)5min
-加15ul ??DME；加45uI?腈混勻
-標(biāo)記后的N聚糖樣品?于LC-FLR or LC-MS檢測(cè)分
質(zhì)量控制 ｜Quality Control
產(chǎn)品組分：經(jīng)LC?譜純化，QE HF 超?分辨質(zhì)譜分析，試劑中N-聚糖標(biāo)簽：NHS化合物為3:2
標(biāo)記效率：mAb抗體糖蛋?濃度為0.37ug/ul，N-聚糖濃度為20ug/ul標(biāo)記PNGase F酶切15ug糖蛋?釋放的N-聚糖，標(biāo)記效率99.5%
熱穩(wěn)定性：N-聚糖標(biāo)簽試劑在??DMF室溫下8?時(shí)穩(wěn)定；標(biāo)記的糖胺在室溫24?時(shí)穩(wěn)定，質(zhì)譜電離耐熱320℃
化學(xué)不穩(wěn)定性：親和試劑SDS、Tris、DTT、胺、硫醇等濃度?于0.1mM不穩(wěn)定。
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