rAsp-N 蛋?酶,質(zhì)譜級(jí)
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HLS ASP001N rASP-N 蛋?酶 2μg
說(shuō)明:rAsp-N 蛋?酶是重組表達(dá)的?屬蛋?酶,來(lái)源于Pseudomonas fragi菌。特異性裂解天冬氨酸(D)和半胱氨酸(C)的N端肽鍵。如果
半胱氨酸還原或烷基化,僅-Asp-X裂解。?于蛋?測(cè)序表征和蛋?組學(xué)研究。
物理形態(tài):含78.8ug Tris-HCl,0.16mg海藻糖?粉
分?量:22.4kDa
復(fù)溶:20ul 超純?即濃度0.1ug/ul避免反復(fù)凍溶
儲(chǔ)存條件:-20°C冰箱冷凍
保質(zhì)期:12個(gè)?在-20°C冰箱
pH 值范圍:在P H 7 . 5 -8.5 時(shí),rASp-N 具有最佳活性
推薦SOP:
-適?酶切緩沖溶液:20mmol Tris,50mmoI ABC或HEPES緩沖液;pH值在7-8范圍內(nèi)
-變性蛋?樣品:按照1:10/50蛋?酶和蛋?量使?,酶切反應(yīng)蛋?濃度控制在0.2-0.5ug/ul,37°C?浴孵育2?時(shí)
質(zhì)量控制 |Quality Control
純度:液相?譜280nm檢測(cè)雜質(zhì)蛋?質(zhì)峰強(qiáng)度,rAsp-N峰強(qiáng)度?于97.0%
專?性:胰??糖素蛋?Glucagon經(jīng)過(guò)rAsp-N 37°C酶切2?時(shí),ESI-MS/MS質(zhì)譜分析特異性肽段專?性100%
活性:1800unit/mg;
單位定義:1ug rAsp-N蛋?酶稀釋50倍與0.072umol抗菌肽A蛋?反應(yīng)的量,反應(yīng)條件:50ul 20mmol Tris,pH=8.0,37°C?浴孵育1?
時(shí),HPLC?譜分析
LC-MS/MS 質(zhì)譜分析:50ug 胰??糖素蛋?Glucagon加50ul 50mmol Tris,1ug rASp-N,37°C孵育2?時(shí),通過(guò)ESI QE HF液質(zhì)分析特異性(包括錯(cuò)切和漏切)
?特異性:蜂毒肽和Fequesetide經(jīng)過(guò)rAsp-N,37°C酶切1?時(shí),ESL-MS/MS質(zhì)譜分析未檢出?特異性肽段。