rLys-C蛋?酶，質(zhì)譜級
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HLS LYS001C rLys-C 蛋?酶 20μg
HLS Hac001 50mM醋酸溶液 400μl
說明：質(zhì)譜級rLys-C蛋?酶特異性?解在賴氨酸?段的C端的肽鍵。可?于提?對不易?解的蛋?質(zhì)的消化;推薦在6-8M尿素溶液中進(jìn)?
物理形態(tài)：質(zhì)譜級rLys-C蛋?酶是凍?粉，含0.5mg海藻糖/瓶
分?量：27kDa
溶解液(HLS HAc001C)：rLvs-C蛋?酶復(fù)溶解緩沖液建議1mM鹽酸或50mM醋酸
儲存條件：凍?粉末存儲在-20°C冰箱，再溶解的酶儲存在-20°C。有效期見產(chǎn)品標(biāo)簽
保質(zhì)期：24?在-20°C
pH 值范圍：在 8-9 時(shí),rLys-C具有最佳活性
適?范圍：rLys-C蛋?酶特異性?解變性后?較不易酶切的蛋?質(zhì)K位，推薦和Trypsin混合使?
混合酶推薦S O P：
A.通?溶液酶解法：
100ug Trypsin/20ug rLys-C混合酶按照 25:1蛋?和蛋?酶的量(w/w)使?,37°C恒溫過夜13-16?時(shí)
溫馨提?：尿素的濃度最好?于1M,50mM Tris-HCI緩沖溶液(pH 8)
B.1+1步溶液酶解法：
1.100ug Trypsin/20ug rLys-C 混合酶按照 25:1 蛋?和蛋?酶的量(w/w)使?,37°C.恒溫酶解2-4?時(shí)
溫馨提?：尿素的濃度為6-8M,50mM Tris-HCI 緩沖溶液(pH 8)
2.稀釋上?步的溶液6倍，37°C恒溫過夜13-16?時(shí)
溫馨提?：尿素的濃度最好?于1M,50mM Tris-HCI緩沖溶液(pH 8)
質(zhì)量控制 ｜Quality Control
純度：液相?譜280nm檢測雜質(zhì)蛋?質(zhì)峰強(qiáng)度，rLys-C峰強(qiáng)度?于99.9%
專?性：E.coli?腸桿菌樣品，ESI-MS/MS質(zhì)譜分析K端的專?性?于99.5%
活性：25unitmin/mg:單位定義:rLy-C?蛋酶每分鐘酶切1.0 umole T-G-P Lys Nitroanilide的量，反應(yīng)條件:25°℃，波長405nm
Maldi TOF質(zhì)譜檢測：純化后的蛋?酶使?HCCA基質(zhì)激光解析質(zhì)譜分析未見雜質(zhì)蛋?質(zhì)峰
LC-MS/MS 質(zhì)譜分析：使?rLys-c酶解HSA(??清?蛋?，純度99.9%)實(shí)驗(yàn)，DTT還原，IAA保護(hù),PH8.0,37°C恒溫過夜16?時(shí),液質(zhì)QE
聯(lián)?儀 分析，覆蓋率87%。
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